在國產(chǎn)elisa試劑盒檢測實驗中，zui讓大家關注的往往是一些操作技巧、步驟、保存、注意事項，其實只要這些方面做好了之后基本就沒有什么問題了。但是也有客戶反映，為什么我每一步都按照要求去做還是沒有做好呢？這就很可能是操作細節(jié)的問題了。大家整理出一份ELISA實驗的細節(jié)優(yōu)化方案，這些ELISA優(yōu)化是否在您的重點思慮范圍之內(nèi)呢？
一、包被原的性質
1.親和素生物素：先親和素先包被載體，加入生物素化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。
2.脂類物質：可將其在有機溶劑中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質自然干固在固相表面。
3.小分子必須依靠和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。
二、包被液的選擇
一般選擇ph9.6的碳酸鹽緩沖液。但有時由于試驗的需要，包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包。上海恒遠提醒應當注意，由于蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用，這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體表面。具體的試驗還要有堅固的理論外也要實踐，看一下zui終可不可以應用到自己試驗當中去。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液，還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
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